Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑配制說明書

聚乙烯亞胺(PEI)是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子，每相隔二個(gè)碳個(gè)原子，即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿"(proton sponge)體。PEI，可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(分子量25000)被證明為轉(zhuǎn)染效率zui hao的PEI轉(zhuǎn)染試劑，下面就以PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(貨號(hào)：23966-1/23966-100)為例來說明Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑的配制過程。

一、產(chǎn)品特性

二、溶液配制

材料：1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑（23966-1）、1L 純水、12 M鹽酸、10M氫氧化鈉、一次性 0.1-0.2µm PES 真空無菌過濾器、無菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。

器材：1 L 玻璃燒杯、1 L 玻璃量筒、核準(zhǔn) pH 計(jì)、2 支 1 mL 塑料移液管、托盤、聚四氟乙烯（PTFE）攪拌棒、真空泵配制過程： 

1. 取1g PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑（23966-1）溶于900ml水中；

2. 加熱到60-80℃并攪拌；

3. 加入HCl，調(diào)節(jié)PH 2.0；

4. 蓋上燒杯，攪拌3h，直到PEI 25K™線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑（23966-1）粉末wan全溶解為止；

5. 冷卻，直至室溫；

6. 再加入NaOH ，調(diào)節(jié)pH 6.9-7.1；

7. 將調(diào)節(jié)好的溶液移到量筒中，加水至1L；

8. 真空過濾消毒；

9. 將消毒好的溶液進(jìn)行分裝，分裝好的溶液在-20°C下 保存。

備注：加熱/加酸都有利于 PEI 溶解。加酸的時(shí)候注意用量，多次少量，達(dá)到PEI wan全溶解即可。 

試劑儲(chǔ)存：冷凍部分溶液可在-20°C 保存長(zhǎng)達(dá)一年；部分解凍的溶液可在 4°C 保存2 周，注意不可反復(fù)凍融。

粉末儲(chǔ)存：未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。