如何選擇蛋白表達(dá)系統(tǒng)？

在蛋白表達(dá)系統(tǒng)的相關(guān)研究中，從頭合成蛋白質(zhì)并不是一個可行的選擇。因此需要借助活細(xì)胞或細(xì)胞器用作生產(chǎn)和構(gòu)建蛋白質(zhì)的工廠。那么你知道該如何選擇蛋白表達(dá)系統(tǒng)嗎？讓我們一起來看看吧！

目前，較為主流的表達(dá)宿主有大腸桿菌（E.coli）、畢赤酵母（P.pastoris）、昆蟲-桿狀病毒（Bac-to-Bac系統(tǒng)）以及哺乳動物細(xì)胞系（CHO、HEK293）等。

一、細(xì)菌

優(yōu)點：

1. 遺傳背景清楚；

2. 繁殖快、成本低、抗污染能力強；

3. 表達(dá)量高、表達(dá)產(chǎn)物分離純化相對簡單、穩(wěn)定性好；4. 商品化的載體和菌株種類非常齊全、適用范圍廣等。

缺點：

1. 沒有真核轉(zhuǎn)錄后加工的功能，沒有翻譯后修飾；

2. 表達(dá)的蛋白質(zhì)經(jīng)常是不溶的，容易形成包涵體；

3. 有一些真核蛋白的產(chǎn)量和活性較低；

4. 難以表達(dá)大分子哺乳動物蛋白質(zhì)；

5. 可能會產(chǎn)生一些致熱源(內(nèi)毒素)

二、酵母

優(yōu)點：

1. 結(jié)合了真核和原核的優(yōu)點，可生產(chǎn)翻譯后修飾的分泌蛋白和胞內(nèi)蛋白；

2. 經(jīng)濟(jì)高效，部分真核翻譯后修飾，如糖基化，磷酸基化。

缺點：

1. 可能形成不正確的蛋白糖基化；

2. 培養(yǎng)上清多糖濃度高不利于純化

三、哺乳動物穩(wěn)定表達(dá)系統(tǒng)

優(yōu)點：

1. 蛋白活性：翻譯后再加工修飾折疊的功能產(chǎn)生的外源蛋白質(zhì)，更接近于蛋白質(zhì)的天然狀態(tài)。

2.正確的高級結(jié)構(gòu)（如糖基化）。

3.在蛋白的起始信號、加工、分泌、糖基化方面具有優(yōu)勢，適合表達(dá)完整的大分子蛋白。

缺點：

培養(yǎng)基成本高，培養(yǎng)周期長，至少一個月以上，培養(yǎng)較困難，表達(dá)量較低。構(gòu)成復(fù)雜、操作技術(shù)要求高、表達(dá)產(chǎn)量不大、產(chǎn)率低

四、哺乳動物瞬時表達(dá)系統(tǒng)

優(yōu)點：

1. 適度快速表達(dá)

2. 很好表達(dá)膜蛋白和分泌蛋白

3. 所有蛋白都能進(jìn)行折疊和最真實的翻譯后修飾

缺點：

1. 比較貴

2. 胞內(nèi)蛋白產(chǎn)量低

總之，各種表達(dá)系統(tǒng)各有優(yōu)缺點，因此，選擇表達(dá)系統(tǒng)時，應(yīng)充分考慮各種因素更多有關(guān)蛋白表達(dá)系統(tǒng)的選擇問題，請聯(lián)系天津益元利康科技有限公司：