Elabscience乙醛脫氫酶(ALDH)比色法測試盒適用于檢測動物組織、血清(漿)等樣本中乙醛脫氫酶(ALDH)的活力。

檢測原理：

酒精代謝的主要途徑是乙醇脫氫酶(ADH)氧化成乙醛，然后是 NADH 依賴的乙醛脫氫酶(ALDH)氧化成乙酸。本試劑盒檢測原理是底物在乙醛脫氫酶的作用下，將 NAD+轉化為NADH，NADH在電子耦合劑的作用下使WST-8 顯橙黃色，通過測定450 nm下吸光值變化可測得乙醛脫氫酶活性。

樣本準備：

① 樣本處理

血清(漿)樣本：直接測定。組織樣本：組織樣本使用生理鹽水(0.9% NaCl)勻漿處理。離心后取上清進行測定，部分上清樣本用于蛋白濃度測定。

② 樣本的稀釋

在正式檢測前，需選擇2-3個預期差異大的樣本稀釋成不同濃度進行預實驗，根據(jù)預實驗的結果，結合本試劑盒的線性范圍：0.01–10.0 U/L。

操作步驟：

① 標準孔：取20μL 不同濃度的標準品溶液加入相應的酶標孔中。

測定孔：取20μL 待測樣本加入測定孔中。

② 向步驟①中各孔依次加入160μL 反應工作液。

③ 向步驟②中各孔依次加入20μL 試劑四。

④ 振板3 s，室溫避光靜置5 min，酶標儀450 nm下檢測各測定孔初始OD值 A1。

⑤ 37°C下避光孵育反應45 min。

⑥ 酶標儀于 450 nm 波長檢測各測定孔OD值A2和各標準孔OD值，計算測定孔變化 OD 值△A (注：△A = A2- A1，標準孔只需要檢測A2值)。

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