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更新時間：2024-04-11
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產品名稱：南京建成丙氨酸氨基轉移酶測試盒微板法(C009-2-1)現貨供應
產品貨號：C009-2-1
產品品牌：南京建成
產品規格：96T
操作過程：
1、樣本前處理:
①、血清（漿）及其它液體樣本待測：直接測定。
②、動物組織樣本：準確稱取組織重量，按重量（g）：體積 (mL)=1:9 的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件 下機械勻漿，2500 轉/分，離心 10 分鐘，取上清液待測。
③、培養細胞樣本前處理：將收集好的細胞用等滲緩沖液（推 薦 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水）清洗 1～ 2 次；1000 轉/分,離心 10 分鐘,棄上清,留細胞沉淀，加入勻 漿介質（推薦加入 0.1mol/L pH7～7.4 磷酸鹽緩沖液或生 理鹽水），冰水浴條件下超聲破碎或手動勻漿，制備好的 勻漿液不離心，待測。
2、操作表：
測定孔 | 對照孔 | |
基質液（μL）37℃已預溫 | 20 | 20 |
待測樣本（μL） | 5 | |
37℃反應 30 分鐘 (測定孔每吸取一個樣本，將吸嘴伸入孔板底部基質液中， 反復吸打混勻,但注意不要吸入氣泡) | ||
2，4—二硝基苯肼液（μL） | 20 | 20 |
待測樣本（μL） | 5 | |
37℃反應 20 分鐘 (對照孔每吸取一個樣本，將吸嘴伸入孔板底部液體中，反 復吸打混勻, 但注意不要吸入氣泡) | ||
0.4mol/L 氫氧化鈉液（μL） | 200 | 200 |
輕輕水平搖動 96 孔板混勻，室溫放置 15 分鐘，波長 510nm，酶標儀測定各孔 OD 值，以絕對 OD 值(測定孔 OD 值減去對照孔 OD 值），查標準曲線，求得相應的 ALT/GPT 活力單位。 | ||
注意事項：
1、比色法中常用的有賴氏（Reitman-Frankel）法及金氏（King）法。賴氏法標準曲線所定單位數，是用實驗方法和卡門氏分光 光度法（速率法）作對比測定求得的。以卡門氏單位報告結果，比較準確。 卡門氏單位定義：1mL 液體，反應液總容量3mL，波長340nm，1cm 光徑，25℃，1min 內所生成的丙酮酸，使NADH氧化成 NAD+而引起吸光度每下降0.001 為一個單位（1卡門氏單位=0.482 U/L，25℃）。
2、一般血清標本內源性酮酸很少，血清對照孔吸光度值接近試劑空白孔（以雙蒸水代替血清，其他和對照孔同樣操作）。所以，成批標本測定時，一般不需要每一標本都作本身血清對照孔，以試劑空白孔代替即可，但對脂血、黃疸或溶血血清，每份標本應作對照孔。
3、酶活力超過 150 卡門氏單位時，用生理鹽水稀釋血清后重測。
4、應將一般血清的對照孔（或稱標本空白孔）的吸光度作為日常質控的指標之一；如相差大，可考慮α-酮戊二酸濃度、DNPH濃度及儀器等原因引起。
5、血清中 ALT 在室溫（25℃）可保存2 天，在0～4℃可保存一周，在-25℃可保存 1 個月。
歡迎訂購：
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
C009-2-1 | Alanine aminotransferase Assay Kit | 96T |
天津益元利康生物科技有限公司現貨供應南京建成丙氨酸氨基轉移酶測試盒微板法(C009-2-1)，歡迎選購！
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