siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)原理和步驟

一、轉(zhuǎn)染試劑

中科百抗PolyTool™siRNA Transfection Reagent（siRNA專用轉(zhuǎn)染試劑，貨號(hào)：BM350104）是一款新型、高性能的siRNA專用轉(zhuǎn)染試劑，具有較強(qiáng)的siRNA壓縮能力，能夠?qū)?/span>RNA高效率、無(wú)損地遞送到真核細(xì)胞中。與其它轉(zhuǎn)染試劑相比，具有不受血清影響、毒性低、效率高、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

二、產(chǎn)品特點(diǎn)

1.不受血清影響：轉(zhuǎn)染前無(wú)需換液，轉(zhuǎn)染效果不受培養(yǎng)基中血清影響；

2.毒性低：低細(xì)胞毒性，轉(zhuǎn)染后對(duì)細(xì)胞活力影響極小；3.穩(wěn)定性高：本產(chǎn)品可穩(wěn)定保存2年；

4.操作簡(jiǎn)單：轉(zhuǎn)染只需4步，使用方法簡(jiǎn)便；

5.低siRNA用量：使用更少的siRNA，依然有更高的沉默效率。

三、實(shí)驗(yàn)流程  

1.細(xì)胞種板：參考附錄推薦密度接種細(xì)胞，使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到60%~70%。

2.細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

（1）使用本轉(zhuǎn)染試劑前渦旋5秒，然后取X μL轉(zhuǎn)染試劑至添加好Y μL opti-MEM培養(yǎng)基的無(wú)菌EP管中，吹打混勻；

（2）向(1)所述溶液中添加Z μg質(zhì)粒DNA（建議質(zhì)粒siRNA濃度配制為100 ng/μL或10 μM），吹打混勻；

（3）將(2)所述溶液室溫靜置10~15 分鐘；

（4）將(3)所述溶液加入(1)所述細(xì)胞培養(yǎng)板的一個(gè)孔中（可根據(jù)需要的孔量配制母液）。

3.檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果：37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)后檢測(cè)基因沉默效率。

siRNA專用轉(zhuǎn)染試劑中科百抗PolyTool™ siRNA Transfection Reagent代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等多個(gè)方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷(xiāo)售，經(jīng)營(yíng)的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品、及時(shí)到位的服務(wù)，努力成長(zhǎng)為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。