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        首頁 > 技術文章 > takara一步法RT-qPCR說明書

        takara一步法RT-qPCR說明書

         更新時間:2024-12-11    點擊量:739

        一、產品目錄表

        一步法RT-qPCR探針法檢測試劑盒One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix (or with UNG)

        品牌

        Code No.

        產品名稱

        包裝量

        價格(元)

        Takara

        RR600A

        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix

        200 Rxns

        詳詢

        Takara

        RR600B (A × 5)

        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix

        200 Rxns × 5

        詳詢

        Takara

        RR601A

        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG

        200 Rxns

        詳詢

        Takara

        RR601B (A × 5)

        One Step PrimeScript™ III RT-qPCR Mix, with UNG

        200 Rxns × 5

        詳詢

         

         

         

        image.png


        二、產品特點 

        · wanpremix型、操作簡單、probe法One Step RT-qPCR。
        · zuo
        的抗反應阻礙物能力、粗提樣品可以使用本產品
        · 新增UNG版本,可防止假陽性產生

        ■ 制品內容

        One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix (Code No.: RR600A,200次,25 μl反應體系)

        1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix(2×)

        625 μl × 4

        2. RNase Free Water

        1.25 ml × 2

        3. ROX Reference Dye(50×conc.)*

        100 μl

        4. ROX Reference Dye II(50×conc.)*

        100 μl


        One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix with UNG (Code No.: RR601A,200次,25 μl反應體系)

        1. One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix, with UNG(2×)

        625 μl × 4

        2. RNase Free Water

        1.25 ml × 2

        3. ROX Reference Dye(50×conc.)*

        100 μl

        4. ROX Reference Dye II(50×conc.)*

        100 μl


        * 使用Applied Biosystems Real-Time PCR儀器等,需要進行孔與孔之間的熒光信號校正時添加該試劑。


        ◆ 需要使用ROX Reference Dye (50×) 校正的儀器
        Applied Biosystems 7900HT/7300 Real-Time PCR System
        StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
        ◆ 需要使用ROX Reference Dye II (50×) 校正的儀器
        Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
        ◆ 不需要使用ROX Reference Dye校正的儀器
        Thermal Cycler Dice Real Time System系列
        LightCycler/LightCycler 480 system (Roche Diagnostics)
        CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)


         

        ■ 制品說明


         image.png


        反應阻害物耐受實驗











        image.png 



        圖1.阻害物耐受實驗






        在反應液中添加5種反應阻害物,分別使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix、Takara以往產品及其他公司的產品進行阻害物質耐受實驗。結果表明,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對添加各種阻害物質和無添加組比較,Ct值之間的差值很小,顯示該制品對于各種阻害物具有很高的耐受性。






        target

        Human ACTB基因

        探針

        Takara qPCR Probe

         






        image.png 



        圖2.Multiplex反應的再現性






        以Human HeLa Cell Total RNA 1 pg~100 ng為模板,使用One Step PrimeScript III RT-qPCR Mix對ACTB、GAPDH、PPIA、YWHAZ基因進行multiplex表達分析。對于所有目標序列,滿足R2>0.99。




         






        Standard



        - Actin E = 97.1% R2= 0.996 Slope=-3.393 y-int=33.278



        - YWHAZ E = 95.6% R2= 0.997 Slope=-3.433 y-int=35.528



        - GAPDH E = 100.6% R2= 1.000 Slope=-3.307 y-int=35.400



        - PPIA E = 97.1% R2= 0.999 Slope=-3.395 y-int=33.800





             TAKARA代理——天津益元利康生物科技有限公司,如需,請聯系。


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