康寧基底膜基質(zhì)可以以幾種方式使用。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細(xì)胞，厚層凝膠法允許您在三位基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞，薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復(fù)雜的蛋白質(zhì)層，您可以在其上培養(yǎng)細(xì)胞。您的選擇基于您想要實(shí)現(xiàn)的最終結(jié)果，無(wú)論是細(xì)胞生長(zhǎng)、附著還是分化。

  注意：在康寧支持網(wǎng)頁(yè)上發(fā)布了具體的應(yīng)用程序*。康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的蛋白質(zhì)濃度是批次特異的并提供在分析證明書上。通過(guò)計(jì)算需要的特定蛋白濃度(mg/mL)獲得了稀釋康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的一致結(jié)果。為了維持凝膠化的一致性，我們推薦不要將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到少于 3 mg/mL。請(qǐng)使用冰冷的無(wú)血清培養(yǎng)基來(lái)稀釋康寧基底膜基質(zhì)。通過(guò)在冰上移液管上下吸液或渦旋小瓶來(lái)混合。

一、薄層凝膠法

  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。

  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上，以 50 µl/cm2向生長(zhǎng)表面加入康寧基底膜基質(zhì)。

  3. 將培養(yǎng)板放置在 37 °C ，30 分鐘。

  4. 如果有必要的話，請(qǐng)?jiān)谑褂脽o(wú)血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結(jié)合的材料。請(qǐng)確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

二、厚層凝膠法

  1.  依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。

  2. 將培養(yǎng)板放置在冰上。向康寧基底膜基質(zhì)中加入細(xì)胞并使用預(yù)冷的移液管懸浮。以150-200 µl/cm2向生長(zhǎng)表面加入康寧基底膜基質(zhì)。

  3. 將培養(yǎng)板放置在 37°C，30 分鐘。現(xiàn)在可以添加培養(yǎng)基了。細(xì)胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部。

三、薄層包被法

  1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì)。使用預(yù)冷的移液管，將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。

  2. 使用無(wú)血清培養(yǎng)基將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到需要的濃度。對(duì)于您的應(yīng)用程序，您應(yīng)該完成以經(jīng)驗(yàn)為主的研究來(lái)確定您的最適包被濃度。

  3. 向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質(zhì)。加入的量應(yīng)該足以容易地覆蓋整個(gè)生長(zhǎng)表面。在室溫下培養(yǎng) 1 個(gè)小時(shí)。

  4. 吸出未結(jié)合的材料并使用無(wú)血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。

康寧基質(zhì)膠代理——天津益元利康生物科技有限公司，成立于2018年，坐落于天津經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、 細(xì)胞生物學(xué)等多個(gè)方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營(yíng)的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品、及時(shí)到位的服務(wù)，努力成長(zhǎng)為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。