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        BioLegend流式抗體選擇指南

         更新時間:2025-07-29    點擊量:56

         一、流式抗體核心選擇原則(快準狠!)  

         1. 按樣本物種選克隆號  

        物種

        推薦抗體來源

        明星克隆號舉例

        小鼠抗人

        CD3-UCHT1

        小鼠

        大鼠抗小鼠

        CD4-GK1.5

        大鼠

        小鼠抗大鼠

        CD45-OX1

        > ? 避坑:勿用人源化抗體做小鼠實驗(交叉反應假陽性)  

         2. 按靶標表達量選熒光染料  

        image.png

         3. 按激光器選染料組合  

        儀器配置

        推薦方案

        單激光(488nm

        FITC + PE + PerCP

        雙激光

        FITC + PE-Cy7 + APC

        四激光

        BV421 + PE + APC + Spark NIR780

         

         二、流式抗體3步速選流程圖(收藏!)  

        image.png 

         三、流式抗體高頻問題解決方案  

         1. 信號弱/無信號  

        - 對策:  

          1. 檢查抗體有效期(≤1年)  

          2. 增加抗體濃度(常規1:100 → 1:50)  

          3. 改用高亮度染料(如FITC→PE)  

         2. 背景噪音高  

        - 對策:  

          1. Fc阻斷劑(BioLegend 422301)  

          2. 優化破膜時間(胞內染≤30min)  

          3. 設置FMO對照  

          3. 多色串擾嚴重  

        - 對策:  

        沖突組合

        替代方案

        FITC vs PE

        改用PerCP

        APC vs PE-Cy7

        改用APC-Cy7

         

         

         四、萬能多色方案模板  

         4色基礎版(適合凋亡/周期分析)  

        通道

        靶標

        FITC

        Annexin V

        PE

        CD4

        PerCP

        CD8

        APC

        PI/7-AAD

        8色免疫分型版(適合T/B/NK分析)  

        通道

        靶標

        BV421

        CD3

        PE

        CD4

        APC

        CD8

        PE-Cy7

        CD19

        APC-Cy7

        CD56

        Spark NIR685

        CD16

        FITC

        CD45

        PerCP

        HLA-DR

         五、流式抗體品牌選購建議  


        需求

        推薦品牌

        明星產品線

        高性價比

        BioLegend

        PureBlk™ 阻斷劑

        超高靈敏度

        BD Biosciences

        Horizon™ 染料

        稀有靶標

        Thermo Fisher

        eBioscience™



        BioLegendBD BiosciencesThermo Fisher代理——天津益元利康生物科技有限公司,提供各種蛋白、細胞、菌株、抗體、試劑盒、耗材等,歡迎咨詢選購。

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