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細胞的凍存

2023-02-22 細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，利用凍存技術將細胞冷凍保存在-196℃液氮中，可以使細胞暫時停止生長并保留細胞特性，以便在需要時再復蘇細胞用于實驗。同時保存適量的細胞，可以防止細胞在培養過程中因受到污染或其他意外事件導致細胞丟種，起到細胞保種的作用。細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則，慢速冷凍可使細胞內的水份滲出細胞外，減少細胞內形成冰晶的機會；快融以保證細胞外結晶快速融化，避免慢速融化水份滲入細胞內，再次形成胞內冰晶造成對細胞的損傷。細胞凍存時需向培養基中加入冷凍保護劑...

mRNA疫苗工作原理

2023-02-20 新冠mRNA疫苗的工作原理是將病毒的部分mRNA片段（S蛋白序列或S蛋白上受體結合區RBD序列）以特殊的脂質膜包裹，注入人體細胞內產生抗原，再由此激發特異性免疫反應，達到形成免疫記憶的效果。相較于其他疫苗，其優勢主要體現在：1.mRNA不進入細胞核，不會整合到人體基因組，消除了插入突變，極大程度上避免了引發患腫瘤癌癥等疾病的風險；2.具有體液免疫及T細胞免疫雙重機制，免疫原性強；3.研發周期短，尤其是在應對病毒變異時，只需對S蛋白序列的堿基進行突變，就能夠快速開發新型候選疫苗...

PCR/qPCR耗材選擇——密封產品篇

2023-02-17 最常見的是聯排管蓋和粘性封板膜。聯管蓋主要用于密封PCR/qPCR聯管和板，粘性封板膜主要用于密封PCR/qPCR板。qPCR的管蓋與封板膜應該相同厚度和透明度的光學特性。1.管蓋聯蓋是最常見的密封形式。除了適配性外，還需要考慮管蓋的透光度和形狀。雖然管蓋的透明度對DNA擴增沒有影響，但超透明或光學蓋對于在qPCR實驗中收集可靠數據非常重要。管蓋的頂部分為平頂（flat）或圓頂(domed)。如何選擇取決于所使用的PCR儀熱蓋設計。如果蓋子具有稍微凹入的內表面以防止管子變形，...

給藥泵的使用優勢

2023-02-16 給藥泵的原理：當泵體被植入動物體內時，由于滲透壓差迫使體液透過泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層，擠壓貯藥囊，使藥物按照預定速度經導流管釋放到大鼠(包括幼體)、小鼠和其他實驗動物動物體內。該泵由外到內分為三層，最外層是半透膜材料，最內層為不透水彈性材料制成的貯藥囊，中間為高滲的鹽夾層組成。給藥泵的優勢：該泵對實驗動物連續、準確、受控的給藥。可以實現無人值守、準確給藥的效果，從而減輕實驗室工作人員的夜班和周末給藥的麻煩，節約了時間，同時無需外部連接和頻繁處理動物，極大的提高了治療的效...

PCR/qPCR耗材選擇——板類特征篇

2023-02-15 ①規格：PCR/qPCR板一般有24孔、48孔、96孔、384孔。②裙邊：裙邊是孔板周圍的板。它的作用是可以在移液過程中提供較好的穩定性，也方便自動化機器人的處理。PCR/qPCR平板可分為無裙邊，半裙邊和全裙邊。無裙邊板缺少周圍的板，它可與絕大多數PCR儀和qPCR儀的模塊適配，但不適用于自動化應用。半裙邊板是在孔板的邊緣有短裙邊，可以在移液過程中提供較好的穩定性，也方便自動化機器人的處理。全裙邊的PCR/qPCR板是有著超過板高度的邊緣板。它適用于具有突出模塊的PCR儀，...

PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

2023-02-13 （1）規格常見的PCR/qPCR耗材規格如下管：0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板：0.2mL,0.1mL384孔板：0.02mLPCR/qPCR管/板的規格決定了反應體積。如果加入過多的樣品，一方面會導致熱傳導的效率下降，另一方面會導致樣品溢出或者污染；如果加入的樣品過少，又會因為頻繁的熱循環導致水分蒸發，進而導致體系不足、樣品損耗，實驗出現誤差或者無結果。并且選用的耗材需根據PCR儀的加熱模塊來決定，以求最DA程度的熱傳導的匹配。（2）高度PCR/qPCR管/板有...

PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

2023-02-09 目前市場上大多數PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機材料，對反應物質的吸收值最小，并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化，在經過溫度變化后不易變形，因此可以確保獲得最佳的PCR結果。在生產過程中，為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性，應當使用全新的醫學級的分子生物學級別的高品質的聚丙烯作為原料進行生產。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機器人的操作，需要具有更高強度的邊框來配合機器人的抓取，通常情況下邊框的材料使用的是更高強度的聚碳酸酯。在...

提取FFPE組織中的核酸時的難點

2023-02-07 使用福爾馬林固定過組織，其組織中的蛋白質與核酸（DNA與RNA）會失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑，將細胞保護在其中，十分影響核酸的提取，并且長時間的保存可能會使樣品中的核酸發生降解。傳統的方法會使用二甲苯來溶解石蠟，這種有機溶劑高度易燃，在實驗過程中需要先多次使用二甲苯來溶解石蠟，之后需要多次使用乙醇來沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過程中，大量的二甲苯可能會對核酸造成損傷，進一步加劇核酸的降解；在溶解與沖洗過程中，即使再仔細也難免將寶貴的組織材料沖掉...