PCR/qPCR耗材選擇——密封產(chǎn)品篇

2023-02-17 最常見的是聯(lián)排管蓋和粘性封板膜。聯(lián)管蓋主要用于密封PCR/qPCR聯(lián)管和板，粘性封板膜主要用于密封PCR/qPCR板。qPCR的管蓋與封板膜應(yīng)該相同厚度和透明度的光學(xué)特性。1.管蓋聯(lián)蓋是最常見的密封形式。除了適配性外，還需要考慮管蓋的透光度和形狀。雖然管蓋的透明度對(duì)DNA擴(kuò)增沒有影響，但超透明或光學(xué)蓋對(duì)于在qPCR實(shí)驗(yàn)中收集可靠數(shù)據(jù)非常重要。管蓋的頂部分為平頂（flat）或圓頂(domed)。如何選擇取決于所使用的PCR儀熱蓋設(shè)計(jì)。如果蓋子具有稍微凹入的內(nèi)表面以防止管子變形，...

給藥泵的使用優(yōu)勢(shì)

2023-02-16 給藥泵的原理：當(dāng)泵體被植入動(dòng)物體內(nèi)時(shí)，由于滲透壓差迫使體液透過泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層，擠壓貯藥囊，使藥物按照預(yù)定速度經(jīng)導(dǎo)流管釋放到大鼠(包括幼體)、小鼠和其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物體內(nèi)。該泵由外到內(nèi)分為三層，最外層是半透膜材料，最內(nèi)層為不透水彈性材料制成的貯藥囊，中間為高滲的鹽夾層組成。給藥泵的優(yōu)勢(shì)：該泵對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物連續(xù)、準(zhǔn)確、受控的給藥。可以實(shí)現(xiàn)無人值守、準(zhǔn)確給藥的效果，從而減輕實(shí)驗(yàn)室工作人員的夜班和周末給藥的麻煩，節(jié)約了時(shí)間，同時(shí)無需外部連接和頻繁處理動(dòng)物，極大的提高了治療的效...

PCR/qPCR耗材選擇——板類特征篇

2023-02-15 ①規(guī)格：PCR/qPCR板一般有24孔、48孔、96孔、384孔。②裙邊：裙邊是孔板周圍的板。它的作用是可以在移液過程中提供較好的穩(wěn)定性，也方便自動(dòng)化機(jī)器人的處理。PCR/qPCR平板可分為無裙邊，半裙邊和全裙邊。無裙邊板缺少周圍的板，它可與絕大多數(shù)PCR儀和qPCR儀的模塊適配，但不適用于自動(dòng)化應(yīng)用。半裙邊板是在孔板的邊緣有短裙邊，可以在移液過程中提供較好的穩(wěn)定性，也方便自動(dòng)化機(jī)器人的處理。全裙邊的PCR/qPCR板是有著超過板高度的邊緣板。它適用于具有突出模塊的PCR儀，...

PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

2023-02-13 （1）規(guī)格常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下管：0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板：0.2mL,0.1mL384孔板：0.02mLPCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積。如果加入過多的樣品，一方面會(huì)導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降，另一方面會(huì)導(dǎo)致樣品溢出或者污染；如果加入的樣品過少，又會(huì)因?yàn)轭l繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā)，進(jìn)而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗，實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)誤差或者無結(jié)果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來決定，以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配。（2）高度PCR/qPCR管/板有...

PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

2023-02-09 目前市場(chǎng)上大多數(shù)PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機(jī)材料，對(duì)反應(yīng)物質(zhì)的吸收值最小，并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化，在經(jīng)過溫度變化后不易變形，因此可以確保獲得最佳的PCR結(jié)果。在生產(chǎn)過程中，為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性，應(yīng)當(dāng)使用全新的醫(yī)學(xué)級(jí)的分子生物學(xué)級(jí)別的高品質(zhì)的聚丙烯作為原料進(jìn)行生產(chǎn)。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機(jī)器人的操作，需要具有更高強(qiáng)度的邊框來配合機(jī)器人的抓取，通常情況下邊框的材料使用的是更高強(qiáng)度的聚碳酸酯。在...

提取FFPE組織中的核酸時(shí)的難點(diǎn)

2023-02-07 使用福爾馬林固定過組織，其組織中的蛋白質(zhì)與核酸（DNA與RNA）會(huì)失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑，將細(xì)胞保護(hù)在其中，十分影響核酸的提取，并且長(zhǎng)時(shí)間的保存可能會(huì)使樣品中的核酸發(fā)生降解。傳統(tǒng)的方法會(huì)使用二甲苯來溶解石蠟，這種有機(jī)溶劑高度易燃，在實(shí)驗(yàn)過程中需要先多次使用二甲苯來溶解石蠟，之后需要多次使用乙醇來沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過程中，大量的二甲苯可能會(huì)對(duì)核酸造成損傷，進(jìn)一步加劇核酸的降解；在溶解與沖洗過程中，即使再仔細(xì)也難免將寶貴的組織材料沖掉...

小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的使用要小心加謹(jǐn)慎

2023-02-03 小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細(xì)胞系的生長(zhǎng)。昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補(bǔ)加FBS,血清提供了細(xì)胞生長(zhǎng)過程中所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素,使細(xì)胞能健康生長(zhǎng)和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點(diǎn):價(jià)格高；每批血清的質(zhì)量不同,影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和病毒復(fù)制；血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難；血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復(fù)雜。因此,無論工業(yè)上或?qū)W術(shù)上,開發(fā)無血清培養(yǎng)基都是必然...

CELLSCRIPT™體外加帽試劑盒工作原理

2023-02-01 CELLSCRIPT™的使命是提供好的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品和技術(shù)，用于制造和使用RNA以便進(jìn)行臨床研究和治療的細(xì)胞翻譯。目前的產(chǎn)品包括多種體外轉(zhuǎn)錄試劑盒、加帽類似物或加帽酶的5'RNA加帽試劑盒和3'RNA多聚腺苷酸化的試劑盒，以及用于轉(zhuǎn)錄、加帽、poly(A)尾mRNA以進(jìn)行翻譯的多合一試劑盒。其中，ScriptCap™Cap1CappingSystem（C-SCCS1710）包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap2'-O-甲基轉(zhuǎn)移酶、GTP和SAM等...