液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些？

液體培養(yǎng)基是最為常見的培養(yǎng)基類型，它具有可進行通氣培養(yǎng)或振蕩培養(yǎng)的優(yōu)勢，因為它的流動性便于精確控制培養(yǎng)基的溶液溫度、營養(yǎng)濃度和氣體含量等；它對細胞生長時的附著能力要求小，細胞可快速擴增；當需要大量細胞培養(yǎng)時也更經(jīng)濟高效。那么你知道液體培養(yǎng)基的常見問題有哪些嗎？讓我們一起來看看吧！

一、液體培養(yǎng)基為什么顏色不一樣

酚紅加量不同，導致顏色差異：DMEM ＞MEM ＞ DMEM/F12 ＞ RPMI1640＞F12 & F10。

二、培養(yǎng)基放冰箱里顏色變深

空氣中CO2濃度低，培養(yǎng)基內(nèi)CO2會逐漸溢出，HCO3-減少，造成培養(yǎng)基偏堿。

三、含有谷氨酰胺培養(yǎng)基的保存條件

谷氨酰胺對溫度敏感，溫度越高降解速度越快。谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定，單獨保存應置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基應存放在2°C–8°C，或者購買不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基使用時添加。

四、液體培養(yǎng)基可以放-20℃及以下保存嗎

不可以。在-20℃下，培養(yǎng)基中的鹽容易析出，培養(yǎng)基融化后，有些鹽無法重新溶解，從而導致滲透壓降低。液體培養(yǎng)基放在2-8℃長期保存。液體培養(yǎng)基保存要避光。培養(yǎng)基中的某些成分遇光會產(chǎn)生過氧化氫，具有細胞毒性

五、購買的液體培養(yǎng)基可以保存多久

理論上只要保存得當，保質(zhì)期范圍之內(nèi)都可以用。但實際開瓶后保存時間過長會導致液體培養(yǎng)基中鹽分的析出和pH值的改變，因此建議開瓶后盡快用完

六、更換培養(yǎng)基后細胞長不好

（1）各廠家培養(yǎng)基配方并非wan全相同，可能細胞已經(jīng)適應當前的培養(yǎng)體系；

（2）原代細胞更容易適應新的培養(yǎng)基，而傳代細胞系更換比較難；

（3）剛復蘇的細胞不要用來適應新培養(yǎng)基，細胞活率低，待狀態(tài)穩(wěn)定后再用來馴化；

（4）敏感性細胞適應培養(yǎng)基，需要多馴化幾代，期間細胞死亡數(shù)量減少，生長緩慢是正常現(xiàn)象。

七、DPBS和PBS有什么區(qū)別，能通用嗎

都屬于磷酸鹽緩沖液，成分上只有一點點磷酸鹽的含量差異，均有等滲和調(diào)節(jié)pH的功能，大多數(shù)對于細胞的使用上可以通用。

八、HBSS 和PBS/DPBS有什么區(qū)別

HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復雜，且含有葡萄糖，可為細胞提供簡單的營養(yǎng)，而PBS/DPBS不能提供營養(yǎng)。

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