引物探針的使用方法有哪些？

2024-11-14 一、引物探針的使用步驟?引物探針使用步驟一：?設計引物和探針?：首先需要根據目標DNA序列設計特異性引物和探針。引物的長度一般為20-25個核苷酸，探針的長度一般為15-25個核苷酸。設計時要注意避免非特異性擴增，確保引物的特異性和探針的Tm值比引物Tm值高8-10°C?。引物探針使用步驟二：?提取模板DNA?：從待測樣本中提取DNA，作為PCR反應的模板。確保模板DNA的質量和濃度，以獲得可靠的實驗結果?。引物探針使用步驟三：?配制PCR反應體系?：根據實驗需求，配制含有引...

IHC出現假陽性、假陰性等問題該怎么辦?

2024-11-13 ?免疫組化（IHC）實驗中出現假陽性和假陰性了怎么辦呢？一、假陽性的處理1.?降低一抗濃度?：通過降低一抗的濃度，可以減少非特異性結合，從而降低假陽性。通常，降低濃度至能看到陽性表達且能明顯區分陽性區域與周圍間質即可?。2.?調整封閉條件?：逐步提高封閉條件，從山羊血清到5%BSA+山羊血清，最終至5%脫脂奶。通常調整至5%BSA+山羊血清即可，不建議輕易使用5%脫脂奶?。3.?選擇合適的二抗?：對于動物標本，選擇抗鼠或抗兔的二抗，避免使用通用型二抗，以免種屬間抗原抗體反應引...

離心柱法提取DNA步驟

2024-11-13 常見核酸提取純化方法苯酚氯仿抽提法、磁珠法核酸分離技術、離心柱純化法等，今天我們來看下離心柱法的實驗步驟和優缺點吧~一、離心柱法提取DNA步驟離心柱法提取DNA步驟一將組織或細胞懸液加入裂解緩沖液，渦旋混勻。裂解緩沖液中含有變性劑（如胍異硫氰酸鹽），可以有效地裂解細胞和組織，破壞細胞膜和細胞核膜，同時使核酸與蛋白質分離。離心柱法提取DNA步驟二將裂解液轉移到DNASpinColumn中，離心收集流穿液。這個步驟涉及到將裂解液通過一個特殊的膜過濾，該膜具有特定的孔徑，允許小分子...

Alzet滲透泵濃度你會計算嗎？

2024-11-12 藥物濃度的調配需根據每日用藥量和緩釋泵的輸送速率兩項參數來計算，每日用藥量可通過查閱專業文獻獲取。此外，每支緩釋泵的輸送速率信息會附在包裝盒上，應根據包裝上的速率進行配藥。濃度計算舉例：2001滲透泵，給藥：抗利尿激素(ADH)，1.查閱文獻發現，大鼠正常的ADH分泌量為30ng/天/只，或1.25ng/小時/只。然后，計算出完成1.25ng/小時所需輸注量所需的ADH濃度：ko=Q?Cd其中ko(µg/hr)是質量輸送速率，Cd(µg/µ...

如何對pcr結果進行分析?

2024-11-12 一、PCR結果分析的基本步驟：?1.基線設置?：實時PCR反應的基線是指在PCR的初始循環期間的信號水平，通常是3至15個循環之間，此時熒光信號幾乎沒有變化，可以認為是背景或反應的噪音。2.?閾值設定?：?qPCR的閾值代表的是明顯超出基線的擴增信號水平，用以區分明確的擴增信號和背景。通常qPCR儀器自帶軟件會自動將閾值設置為基線熒光值標準偏差的10倍。3.?CT值計算?：Ct是指熒光信號超過閾值時對應的循環數，Ct值與目的基因的起始量成反比，可用于計算DNA初始拷貝數。4....

DMEM培養基變色原因

2024-11-12 DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培養基廣泛應用于細胞培養。一般情況下DMEM培養基呈鮮紅色，當細胞狀態、培養條件以及培養基成分發生變化，培養基的顏色也會發生變化。以下是DMEM培養基變色的常見原因：1.pH值變化DMEM培養基中含有酚紅，它是一種pH指示劑，能夠根據培養基的pH值變化而改變顏色。在pH值低于6.8時培養基呈黃色，pH在7.4時為紅色，pH高于8.2時則呈紫色。2.細胞代謝活動細胞在代謝過程中，會消耗培養基中的糖分并產生乳酸...

細胞漂浮也有可能是你操作不當！

2024-11-11 細胞如若在生長過程中遇到漂浮困境，你有沒有想過會是操作不當？！接下來，跟隨康康一起，探討這個非微生物原因導致的細胞培養問題，并找到讓它正常發展的解決方案。復蘇后細胞漂浮原因一：細胞本身貼壁能力較弱比如細胞轉染的明星細胞293T，它生長較快，但貼壁能力弱，容易出現明顯的成片脫落現象。293細胞∝解決辦法：提前使用明膠包被板子，增強吸附性。另外，還建議使用TC處理（tissueculturetreated）的培養瓶/皿促進細胞貼壁附著。復蘇后細胞漂浮原因二：培養基選擇錯誤比如29...

簡石生物瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407操作步驟

2024-11-08 簡石瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒TD407代理——天津益元利康生物科技有限公司。一、產品優點：1.從瓊脂糖凝膠中快速（15分鐘）高產量地回收超純的DNA；2.特制的微量柱設計使得DNA可以在高濃度下洗脫到最小體積（≥10µl）；3.洗脫的DNA非常適合用于DNA連接、測序、標記、PCR等應用。二、操作使用：（以下離心操作步驟的離心力均在10,000-16,000xg之間進行）簡石DNA回收試劑盒操作步驟一：使用刀片或手術刀把DNA片段從瓊脂糖凝膠上切除下來并且移置到...